仿刺参成参体腔细胞酚氧化酶的生化与酶学特性研究

为探究仿刺参成参体腔细胞中酚氧化酶同工酶的生化与酶学特性,分别利用雌性和雄性仿刺参成参的体腔细胞,通过线性连续梯度非变性电泳结合邻苯二酚发色技术鉴定和分离出4种酚氧化酶(AjPO4、AjPO5、AjPO6和AjPO7),并通过分光光度法测定不同酚氧化酶的生化与酶学特性.试验结果显示,4种酚氧化酶最适pH分别为9.0、8.0、9.0和8.0.沸水浴处理显示,4种酚氧化酶均有一定的耐热性,且AjPO4、AjPO5和AjPO6的耐热性强于AjPO7.4种酚氧化酶均可催化邻苯二酚、左旋多巴、多巴胺和对苯二酚,但不能催化酪氨酸,且4种酚氧化酶对邻苯二酚的米氏常数最小,表明4种酚氧化酶均属于漆酶型酚氧化酶,并对邻苯二酚的亲和力最高.4种酚氧化酶均可被M n2+和Fe2+显著激活,表明仿刺参成参酚氧化酶系统的功能发挥可能受到体内二价金属离子的调节.4种酚氧化酶的活性除了受到柠檬酸、亚硫酸钠、抗坏血酸抑制外还受到铜离子螯合剂二乙基二硫代氨基甲酸钠的抑制,表明4种酚氧化酶均为含铜的金属酶.仿刺参成参酚氧化酶的这些酶学特性将为进一步了解仿刺参酚氧化酶系统的特性和功能机制提供参考.