桃转录因子PpWRKY11的克隆及表达分析
Plant Physiology Communications（2019）
摘要
WRKY转录因子能够响应生物及非生物胁迫.本研究基于前期实验室桃花芽休眠解除前后表达量明显下调的Prupe.1G071400基因进行研究,通过定量PCR表明此结果与前期实验结果相符合,证明该基因可能与桃花芽休眠解除密切相关.从桃‘中油四号’叶片克隆了Prupe.1G071400基因,通过生物信息学分析,命名此基因为PpWRKY11;PpWRKY11蛋白编码282个氨基酸,包含特有WRKY结构域.进化树分析发现PpWRKY11与蔷薇科苹果和梨等亲缘关系最为相近;亚细胞定位显示PpWRKY11定位于细胞核中;酵母双杂显示PpWRKY11蛋白没有自主激活活性,进一步对PpWRKY11进行筛库,筛选出互作的蛋白;构建PGEX-PpWRKY11原核表达载体,转化大肠杆菌Rosetta (DE3)诱导出符合大小的蛋白,发现PpWRKY11蛋白主要在沉淀中.
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