人乳头瘤病毒16E7和CulL2依赖蛋白对APOBEC3A蛋白表达及子宫颈细胞迁徙能力的影响

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV) 16 E7基因编码多功能磷酸蛋白,其功能和结构均类似腺病毒,HPV 16 E7可与激活的致癌基因结合,促进肿瘤进展.但是HPV 16 E7对子宫颈细胞迁移的影响和机制尚不清楚.因此本研究探究了HPV16 E7和CulL2依赖蛋白对APOBEC3A蛋白表达及子宫颈细胞迁徙能力的影响.随机选择60名年龄在21～ 55岁间的妇女,分别设置空白对照组(B组)、患有人乳头瘤细胞组(P组)、添加CulL2依赖蛋白组(C组),采用流式荧光杂交法和第二代杂交捕获实验(hc2)检测其子宫颈脱落细胞,进行细胞培养,采用Transwell法检测细胞数,重组质粒DNA分析基因克隆的完整性,代谢标记细胞,进行过氧化氢酶(catalase,CAT)分析.采用实时荧光定量PCR法对CulL2和APOBEC3A基因水平进行评估测定,免疫印迹(Western Blot,WB)检测相关蛋白表达.与B组相比,P组细胞穿透基质胶的细胞数增多,即迁徙能力提高,重组质粒转染后,C组细胞穿透基质胶的细胞数亦明显增多,但增多幅度不如P组,即迁徙能力有所增强(P＜0.05).高风险HPV蛋白E7可上调细胞中APOBEC3A蛋白的表达.APOBEC3A和HPV16 E7与CulL2相互作用,表明在HPV感染期间形成的E7可调节细胞中的APOBEC3A蛋白的水平.反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)结果显示,与B组比较,P组细胞基因表达增加,C组细胞中CulL2和APOBEC3A基因的mRNA表达水平明显减少(P＜0.05).本研究发现HPV16 E7和CulL2依赖蛋白可影响APOBEC3A蛋白表达,并且促进子宫颈细胞的迁徙能力.