肾脏移植早期T细胞受体Vβ链CDR3克隆谱系分析

目的 探讨肾脏移植患者早期(第1个月内)外周血单个核细胞(PBMC)来源的T细胞受体Vβ链CDR3区(TCR VβCDR3)克隆扩增分析.方法 收集10对肾脏移植受者及供者外周血分离PBMC并提取DNA.使用HLA-ABDR配型试剂盒检测其HLA-ABDR分型,分析配型情况.收集肾脏移植患者移植前和移植后早期PBMC,并提取RNA后逆转录成cDNA,使用TCRVβ CDR3特异性引物,扩增TCR并测序和分析克隆扩增情况.最后,对克隆扩增的TCR VβCDR3片段序列进行比较分析.结果 检测和比对了10对肾脏移植受体和供体的HLA-ABDR分型.移植患者移植前未发现TCR克隆扩增现象;而与此相比,移植后早期不同时间(第7、14、28天)均发现单克隆或寡克隆扩增.克隆扩增的TCR Vβ CDR3氨基酸基因片段部分序列有重复出现现象.结论 肾脏移植患者早期外周血TCRVβCDR3出现克隆扩增可能与移植相关.本研究为今后肾脏移植配型以及免疫排斥反应的防治提供参考.