背角无齿蚌σ-GST基因克隆与五氯酚胁迫表达分析

谷胱甘肽S-转移酶(GST)在机体抗击氧化应激中发挥重要作用.我们前期研究表明,五氯苯酚(PCP)处理对背角无齿蚌(Anodonta woodiana)具有显著的氧化应激和急性毒性效应.为了探讨PCP慢性胁迫效应,本研究将背角无齿蚌随机分为对照组和PCP处理组,PCP处理组和对照组分别用13.9 mg/L和相同体积二甲亚砜处理;同时,克隆出σ型谷胱甘肽S-转移酶并命名为σ-GST,分析PCP对σ-GST表达的影响.σ-GST全长cDNA包括132 bp的5'端非编码区,80 bp的3'端非编码区,609bp的开放阅读框(ORF).开放阅读由203个氨基酸组成的多肽链.σ-GST具有GST的标签序列和保守氨基酸,与其他物种σ类GST序列具有高度同源性.σ-GST广泛表达于斧足、外套膜、闭壳肌、心脏、肝胰腺、血淋巴和鳃.PCP处理后,肝胰腺、鳃和血淋巴中σ-GST表达水平显著增加.与对照组相比,PCP处理后肝胰腺σ-GST mRNA水平第1、3和第15天分别增加了28.73％、70.37％(P＜0.05)和6.64倍(P＜0.01).与对照组相比,PCP处理后鳃中σ-GST mRNA水平在整个实验过程中增加了1.14倍.结果 表明,背角无齿蚌ρ-GST表达水平上调有助于对抗PCP处理所产生的胁迫效应,提高动物环境耐受能力.