高效价腮腺炎病毒抗血清的制备及检定

目的：制备高效价腮腺炎病毒抗血清，用于麻腮、麻腮风、麻腮风水痘联合疫苗的病毒滴定及鉴别试验等指标的检定。方法将腮腺炎病毒ME株接种于SPF鸡胚尿囊腔中，优化病毒制备工艺条件，收获高滴度病毒原液，制备免疫抗原；采用皮下多点注射法免疫SPF豚鼠，制备抗血清并对其进行中和效价、中和能力以及特异性干扰试验的检定。结果 ME株腮腺炎病毒以102倍稀释接种鸡胚尿囊腔，培养5 d经－20℃预冷1 h后，收获的尿囊液病毒滴度最高；以其免疫豚鼠所制备的抗血清平均中和效价达1∶3276，高于鸡抗腮腺炎病毒血清；当豚鼠抗腮腺炎病毒血清稀释度为1∶320时，可完全中和1000 CCID50／mL的腮腺炎病毒；豚鼠抗腮腺炎病毒血清对Vero细胞、RK-13细胞及2BS细胞的生长，均未见干扰及细胞毒性作用；豚鼠抗腮腺炎病毒血清对异种病毒（麻疹病毒、风疹病毒和水痘病毒）滴度的干扰试验显示，各病毒滴度其试验组与对照组的差值均＜0．50 lgCCID50／mL，表明豚鼠抗腮腺炎病毒血清对麻疹病毒、风疹病毒和水痘病毒的滴度均无干扰；豚鼠抗腮腺炎病毒血清及鸡抗腮腺炎病毒血清对麻腮风水痘联合疫苗各病毒滴度均无干扰，且两种抗血清之间差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论采用优化后的病毒制备工艺条件及免疫方法，可获得较高效价的抗腮腺炎病毒血清，经检定和验证，均符合含腮腺炎成分疫苗检定抗血清使用要求。