microRNA-708-5p对骨肉瘤细胞凋亡与迁移的作用及机制

该文主要研究microRNA-708-5p(miR-708-5p)在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞凋亡、迁移的影响及机制.该研究利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNA;qRT-PCR(quantitative Realtime PCR)检测miR-708-5p在骨肉瘤细胞株MG63和正常细胞hMSC、HS-5中的表达;通过阳离子月旨质体介导法过表达miR-708-5p;分别用Hoechst 33258染色、流式细胞术、划痕实验、Transwell法检测凋亡和迁移;通过qRT-PCR检测miR-708-5p、ZEB1(Zinc finger E-box binding homeobox 1)的RNA水平;Westem blot检测E-cadherin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达;利用TargetScan和双荧光素酶报告实验预测并验证miR-708-5p与ZEB1的靶向关系.结果 显示,miR-708-5p在MG63中表达下调,恢复miR-708-5p表达水平可诱导MG63细胞凋亡并抑制迁移.Western blot结果显示,过表达miR-708-5p可上调E-cadherin,下调N-cadherin和ZEB1.双荧光素酶报告实验显示,miR-708-5p可直接靶向ZEB1.敲低ZEB1可抑制MG63迁移.该项研究结果表明,miR-708-5p可诱导骨肉瘤细胞凋亡,且通过靶向ZEB1来抑制迁移.