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敲低心肌连接斑株蛋白对人胃癌SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力的影响及机制研究

Chinese Journal of Cell Biology(2018)

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摘要
该文研究了敲低心肌连接斑株蛋白(junction plakoglobin,JUP)对人胃癌SGC-7901细胞迁移和侵袭的影响及其机制.通过shRNA慢病毒介导的方式构建了敲低JUP基因的慢病毒载体序列及其阴性对照病毒,并感染至人胃癌SGC-7901细胞中,荧光检测细胞感染效率,获得JUP 基因稳定沉默及其对照细胞株.用嘌呤霉素筛选阳性转染细胞株,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印记法(Western blot)检测JUP表达水平.采用细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验检测敲低JUP基因之后对人胃癌SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响.采用Western blot检测敲低JUP之后β-连环蛋白水平的影响.结果显示,通过shRNA介导的慢病毒成功构建了敲低JUP基因的人胃癌SGC-7901稳定细胞株.与对照组相比,敲低JUP表达可促进细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),上调了β-连环蛋白的水平(P<0.05).以上结果表明,敲低人胃癌SGC-7901细胞中JUP基因表达后可促进胃癌细胞SGC-7901的迁移和侵袭能力可能与其上调β-连环蛋白的水平从而活化Wnt信号通路有关.
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