蝙蝠葛碱对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的作用及机制研究

目的 研究蝙蝠葛碱对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的作用,探索其抗肿瘤的作用机制和与Hedgehog信号通路的关系.方法 不同质量浓度(2、4、8μg/mL)的蝙蝠葛碱处理Huh7细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Huh7细胞增殖能力的变化;流式细胞术分析细胞凋亡;real-time PCR、Western blotting法检测Hedgehog信号通路相关基因及蛋白表达水平.结果 随着蝙蝠葛碱质量浓度及作用时间的增加,其对Huh7细胞增殖的抑制率升高.其中蝙蝠葛碱8μg/mL作用48h对细胞增殖抑制率最高(48.8％).蝙蝠葛碱可明显诱导Huh7细胞发生凋亡.随着蝙蝠葛碱质量浓度的增大,细胞的凋亡率显著升高(P＜0.05、0.01).与对照组比较,蝙蝠葛碱各质量浓度组细胞Hedgehog信号通路中PTCH1、GLi1、SMO、SHHmRNA和蛋白表达水平显著降低,同时cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高,而Bcl-2表达水平降低(P＜0.05、0.01),并呈质量浓度依赖性.结论 蝙蝠葛碱可明显抑制Huh7细胞的增殖,促进其凋亡,其可能通过抑制Hedgehog信号通路发挥作用.