氯喹增强LOVO细胞对5-氟尿嘧啶化疗敏感性的作用

目的 研究结肠癌细胞LOVO在氯喹(CQ)作用下对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性变化及机制. 方法 用MTT法分别检测CQ和5-FU作用24 h和48 h对LOVO细胞的增殖抑制作用.实验分为4组:空白对照组、CQ组、5-FU组和联合作用组.CQ、5-FU及两者联合作用于LOVO细胞后,通过细胞划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭的变化,采用流式细胞术和TUNEL方法检测细胞凋亡,采用Western blot检测细胞自噬及凋亡相关蛋白的表达情况. 结果 在不同浓度CQ、5-FU作用下LOVO细胞增殖受到抑制,且呈现剂量依赖性,48 h时CQ和5-FU的IC50分别为11.8 μg/ml和2.5 μmol/L.与空白对照组相比,CQ、5-FU作用后细胞迁移率和细胞侵袭能力显著降低,且两药联用组的抑制效应更显著.流式细胞术检测显示,CQ组、5-FU组细胞凋亡率分别为(17.85±1.04)％、(17.36±0.96)％,显著高于空白对照组(4.11±0.23)％,两药联用组凋亡率为(25.03士2.27)％,两药联用组与CQ、5-FU单用组相比,细胞凋亡率更高,差异均有统计学意义(P＜0.01).TUNEL检测显示,CQ组、5-FU组细胞凋亡指数显著高于空白对照组,两药联用组与CQ、5-FU单用组相比细胞核凋亡指数更高.Western blot检测显示CQ和5-FU处理后导致P53、Bax、caspase3、caspase9和P62蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、LC3和Beclin-1蛋白表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论 CQ能抑制结直肠癌细胞LOVO的增殖、迁移、侵袭和自噬,促进其凋亡,并能增强细胞对化疗药物5-FU的敏感性.