重组H7N9亚型流感病毒血凝素(HA)的表达及鉴定

目的为了获得H7N9HA蛋白,利用昆虫杆状病毒表达系统表达了H7N9HA基因并获得重组H7N9亚型流感病毒HA蛋白。方法将H7N9亚型流感病毒的HA蛋白基因扩增并克隆到pFastBacⅠ载体中,构建重组穿梭质粒,转染昆虫sf9细胞后获得重组杆状病毒,对大量培养后表达的H7N9HA蛋白进行SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光检测。分别在0d和14d用纯化的表达产物HA蛋白免疫小鼠。结果测序鉴定重组表达载体构建正确;SDS-PAGE显示纯化的表达蛋白分子质量为67ku;Western blot分析该蛋白能够被鸡抗流感病毒IgG识别;鸡抗流感病毒抗体间接免疫荧光法测定HA蛋白的表达,在感染HA的昆虫细胞中出现特异性荧光。结论成功的表达了H7N9的HA蛋白,并且此HA蛋白能成功的诱导小鼠体内的免疫反应,并起到良好的保护作用。