抑制GATA5蛋白可否促进HELA细胞中癌干细胞因子sox2、c-myc及CD44的表达

背景:GATA5蛋白在多种癌症发生过程中被抑制表达,有研究显示GATA5降低表达或被甲基化后失去功能,不能有效促进干细胞分化,维持细胞的正常功能.宫颈癌HELA细胞表达GATA5蛋白,在宫颈癌中抑制GATA5表达是否可促进其恶性转化还是未知.目的:分析GATA5蛋白在宫颈癌HELA细胞中被进一步抑制表达后,其恶性转化情况及与癌干细胞形成相关因子sox2,c-myc及CD44的表达情况.方法:转入CMV-siRNA-gata5,使GATA5在HELA细胞中被进一步抑制表达后, ①RT-PCR检测c-mycmRNA,sox2 mRNA的表达;②MTT法检测HELA细胞的增殖能力;③检测HELA细胞的集落形成和软琼脂单克隆形成能力;④Western blot检测细胞GATA5、c-myc、sox2蛋白表达变化;⑤激光共聚焦检测细胞的CD44蛋白定位及蛋白表达变化.结果与结论:用CMV-siRNA-gata5抑制HELA细胞中的GATA5表达后,HELA细胞的增殖能力、单克隆形成及集落形成能力均增强;同时发现其癌干细胞因子c-myc,sox2,CD44的表达增强.提示GATA5蛋白被抑制表达后,HELA细胞的恶行性为增加,其机制可能是GATA5被抑制后,促进了癌干细胞因子sox2,c-myc,CD44等的表达.