新生大鼠海马神经干细胞的分离培养及分化研究

研究新生大鼠海马区脑组织中神经干细胞体外培养方法，为治疗神经系统疾病寻找合适的细胞来源。取新生SD大鼠的海马区脑组织，采用accutase结合机械分离法获取神经干细胞，在含有B－27、碱性成纤维生长因子和表皮生长因子的DMEM／F12无血清培养液中培养；Accutase酶消化后传代培养，取第3代细胞行抗巢蛋白免疫荧光染色鉴定并以含10％胎牛血清培养液诱导分化，神经元特异烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色检测NSCs向神经元及胶质细胞分化的能力。分离的新生大鼠海马区脑组织中细胞，在无血清培养液中形成大量的神经球，部分神经球出现融合及贴壁分化现象，细胞呈典型NSCs 形态。经巢蛋白染色鉴定，大部分为阳性细胞。神经细胞球经含有胎牛血清培养液培养后，可分化为神经元特异烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白表达阳性的细胞。从新生大鼠海马组织分离培养的NSCs具有自我更新和增殖能力，在含胎牛血清培养液中具有向神经元和神经胶质细胞分化的潜能。