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siRNA沉默TEAD4基因对人黑素瘤细胞系A375细胞生物学行为的影响

Journal of Chinese Practical Diagnosis and Therapy(2019)

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摘要
目的 探讨siRNA沉默人黑素瘤A375细胞中TEAD4基因对细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法 人黑素瘤A375细胞分为TEAD4-1组、TEAD4-2组、TEAD4-3组和转染试剂对照组(MOCK组),TEAD4-1组、TEAD4-2组、TEAD4-3组细胞分别转染TEAD4-1 siRNA、TEAD4-2 siRNA、TEAD4-3 siRNA,MOCK组细胞转染RNAi-Mate转染试剂.4组细胞采用实时PCR检测TEAD4 mRNA相对表达量.TEAD4-2组和MOCK组采用流式细胞仪检测转染6h时转染成功阳性细胞百分率、转染48 h时细胞周期变化情况,采用流式双染法检测转染48 h时细胞凋亡率.结果 TEAD4-2组TEAD4 mRNA相对表达量(0.208±0.036)低于MOCK组(1.000±0.000)、TEAD4-1组(0.361±0.047)和TEAD4-3组(0.417±0.059)(P<0.05),TEAD4-1组和TEAD4-3组低于MOCK组(P<0.05),TEAD4-1组与TEAD4-3组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染6h时,TEAD4-2组转染成功阳性细胞百分率[(69.830±0.198)%]明显高于MOCK组(0)(P<0.05);转染48 h时,TEAD4-2组G0/G1期细胞百分率[(91.327±0.251)%]和细胞凋亡率[(11.000±0.436)%]均明显高于MOCK组[(85.590±0.610)%、(0.620±0.100)%](P<0.05),G2/M期细胞百分率[(5.473±0.191)%]和增殖指数(0.086±0.003)低于MOCK组[(9.710±1.101)%,0.139±0.006](P<0.05).结论 TEAD4基因表达可促进人黑素瘤细胞系A375细胞增殖、影响细胞周期及抑制细胞凋亡,TEAD4基因可能参与人黑素瘤的发生和发展.
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