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miR-17-5p通过介导自噬调节胶质瘤U251细胞放射敏感性

Chinese Journal of Laboratory Diagnosis(2019)

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摘要
目的 探究miR-17-5p对胶质瘤U251细胞放射敏感性的影响及其机制.方法 经过5 Gy X-射线或模拟照射后,实时定量PCR技术检测72 h内U251细胞miR-17-5p表达变化.U251细胞转染anti-miR-17-5p(AmiR-17组)和阴性对照(阴性对照组)反义寡核苷酸序列,并设置未转染细胞为空白对照组,实时定量PCR技术检测miR-17-5p表达变化;5 Gy X-射线或模拟照射后,CCK8法检测细胞增殖能力;GFP-LC3表达分析检测细胞自噬通量;west-ern bloting检测ATG7蛋白表达.结果 U251细胞在放射后8 h内表现出明显的miR-17-5p表达上调,其中照射后4 h miR-17-5p表达明显于高模拟照射组(P=0.001).转染且5 Gy X-射线照射后,AmiR-17组细胞miR-17-5p表达均明显降低(P=0.006);AmiR-17组细胞48 h存活率均显著低于空白对照组(P=0.037);AmiR-17组自噬水平明显高于阴性对照组,LC3II/LC3I比值明显高于阴性对照组(P=0.021);AmiR-17组ATG7蛋白明显高于阴性对照组(P=0.003).结论 miR-17-5p表达能降低胶质瘤U251细胞放射敏感性,其机制与降低细胞自噬水平有关.
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