ERK-VEGF/MMP-9信号通路与胃癌细胞增殖、转移和侵袭的关联机制

目的 探讨ERK-VEGF/MMP-9信号通路与胃癌细胞增殖和预后转归关联性.方法 离体培养人胃癌细胞MGC-803,72个培养皿的细胞分为三组:对照组(n=24);阻断组(n=24);转染组(n=24).对照组细胞不做任何干预;阻断组细胞应用特异性ERK-VEGF/MMP-9信号通路抑制剂GDC-0994对胃癌MGC-803细胞的ERK-VEGF/MMP-9信号通路进行抑制;转染组细胞转染ERK1质粒.用MTT法检测胃癌MGC-803细胞生长,采取流式细胞仪检测胃癌MGC-803细胞周期及凋亡的变化;采用细胞迁移和侵袭实验分析ERK-VEGF/MMP-9信号通路对胃癌细胞侵袭能力的影响;采取RT-PCR法检测ERK、VEGF以及MMP-9 mRNA,用Westem blot法检测ERK、VEGF以及MMP-9蛋白表达.结果 阻断组MGC-803细胞增殖低于对照组和转染组,转染质粒ERK1则可提高MGC-803细胞增殖率(P＜0.05).阻断组凋亡数量(20.59±3.27)高于对照组(F=281.588,P＜0.05).在GO/G1期,阻断组细胞凋亡数量与对照组比较,并无显著差异(P＞0.05),在S期和G2/M期,阻断组细胞凋亡比率高于对照组(P＜0.05).转染质粒ERK1后,其凋亡数量低于对照组(P＜0.05).在G0/G1期,阻断组细胞凋亡数量与对照组比较,无显著差异(P＞0.05),而在S期和G2/M期,阻断组细胞凋亡比率低于对照组(P＜0.05).与对照组(314.52±52.11)比较,阻断组MGC-803(185.42 ±30.2)细胞迁移数量降低,转染质粒ERK1后MGC-803细胞迁移数量增多(P均＜0.05).与对照组比较,阻断组MGC-803细胞侵袭降低,转染质粒ERK1后MGC-803细胞侵袭能力增强(P＜0.05).阻断组,MGC-803细胞中信号通路的关键效应蛋白ERK、VEGF、MMP-9蛋白表达水平较对照组下调;转染质粒ERK1后ERK、VEGF、MMP-9 mRNA蛋白表达水平较对照组上调.结论 ERK-VEGF/MMP-9信号通路若受到拮抗,则可抑制胃癌肿瘤细胞的增殖并诱导细胞产生凋亡,并下调胃癌细胞迁移和侵袭能力.