高温诱导基质金属蛋白酶9对体外血脑屏障模型claudin-1的影响

目的 用体外血脑屏障(BBB)模型,研究高温下基质金属蛋白酶9(MMP-9)对BBB微血管内皮细胞紧密连接蛋白claudin-1的影响.方法 体外培养大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞,经荧光黄渗透性测定,成功建立体外BBB模型.随机分为常温组(37℃)、高温组(39℃)、常温+MMP-9组(MMP-9 100 ng/L)、高温+MMP-9组,并在30、60和90 min用通透系数(Pe)值观察通透性变化.用免疫组织化学法和Western blot法检测claudin-1表达.结果 高温组较常温组Pe值增加(P＜0.05);高温+MMP-9组较上述2组进一步增加(P＜0.05).相同时间点高温组claudin-1阳性细胞较常温组降低(P＜0.05).90 min时,高温+MMP-9组claudin-1阳性细胞较高温组降低[(75.0±12.8)个/HP vs (97.0±6.1)个/HP,P＜0.05].高温组claudin-1表达较常温组降低(P＜0.05),高温+MMP-9组较相同时间点高温组进一步降低(P＜0.05).结论 高温可导致体外BBB模型claudin-1表达下降,BBB通透性增加.外源性添加MMP-9能进一步加剧该损伤,提示高温可通过MMP-9加重BBB破坏.