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微RNA-9对胃癌细胞内CDX2基因表达的影响

International Journal of Digestive Diseases(2018)

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摘要
目的 探讨改变胃癌细胞中微RN A-9(miRN A-9)的表达水平对尾型同源核转录因子2(CDX2)表达的影响.方法 采用生物信息学预测调控CDX2的目的miRNA.采用脂质体法将miRNA-9类似物、miRNA-9抑制物和无关序列质粒瞬时转染胃癌细胞株AGS、MKN45,以无关序列作为阴性对照.将细胞分为miRNA-9类似物组、miRNA-9抑制物组、阴性对照组、空白对照组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miRNA-9和CDX2 mRNA的表达水平,采用免疫印迹实验(Western blot)检测CDX2蛋白表达.结果 CDX2 mRNA 3′UTR和miRNA-9有高度保守的结合靶点.与空白对照组、阴性对照组相比,miRNA-9类似物组细胞中的CDX2蛋白表达显著降低,miRNA-9抑制物组的CDX2蛋白表达显著上调,而CDX2 mRNA表达未发生显著变化.结论 在胃癌细胞株AGS、MKN45中,miRNA-9具有抑制CDX2蛋白表达的作用,而对CDX2 mRNA表达无影响.抑制miRN A-9表达后,CDX2蛋白表达明显上调.
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