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慢病毒转染大鼠破骨样细胞研究

Chinese Journal of Gerontology(2016)

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Abstract
目的 探讨慢病毒转染大鼠破骨样细胞的可行性.方法 诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养成破骨样细胞(OLC)后,将其用绿色荧光蛋白(GFP)标记的对照慢病毒进行转染,荧光显微镜下观察不同感染复数(MOI)时慢病毒转染OLC的荧光率,并用TRAP染色鉴定OLC.选择最适宜的MOI并加入不同干预进行对照,分为OLC对照组、NFAT2抑制剂(VIVIT)组、NFAT2iRNA慢病毒组、对照病毒组,用RT-PCR进行基因验证.结果 对照病毒转染后,OLC随着MOI值的升高,荧光转染率增加;MOI=15时荧光数最多(41.00±9.19)个/视野.不同干预后,NFAT2抑制剂组和NFAT2iRNA慢病毒组的NFAT2的基因表达明显低于OLC对照组和对照病毒组(P<0.05).结论 慢病毒可转染大鼠破骨样细胞,并在一定范围内随MOI升高转染率增高.
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Key words
Lentivirus,Osteoclast-like cells,Nuclear factor of activated T cells
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