载脂蛋白M对1-磷酸鞘氨醇受体-1表达的影响

目的 探讨载脂蛋白M(apoM)对1-磷酸鞘氨醇受体-1(S1P1)表达的影响.方法 体外实验:采用载有人apoM基因序列(实验组)和不携带apoM基因序列(对照组)的慢病毒分别感染人脐静脉内皮融合细胞(EA.hy926细胞),获得稳定表达的细胞株后提取细胞总RNA和总蛋白,采用RT-PCR技术检测apoM mRNA的过表达情况,并采用RT-PCR和Western Blot法检测S1P1受体的表达情况.体内实验:随机选取8~10周,体质量约25 g的健康apoM基因野生型(apoM+/+,实验组)和apoM基因敲除型(apoM-/-,对照组)C57BL/6小鼠各8只,处死小鼠后取其主动脉提取肝脏RNA,逆转录成cDNA后采用RT-PCR法检测apoM和S1P1 mRNA的表达情况.分别比较体内和体外实验中实验组和对照组apoM mRNA和S1P1蛋白及mRNA的表达情况.结果(1)实验组EA.hy926细胞的S1P1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组细胞(P<0.05);(2)实验组apoM+/+小鼠主动脉S1P1 mRNA和蛋白表达水平也明显高于对照组apoM-/-小鼠(P<0.05).结论 ApoM能够增加体内和体外S1P1 mRNA及蛋白表达水平.