丁酸钠对50％总体表面积烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层保护作用和机制研究

目的 研究丁酸钠对严重烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层的保护作用及可能机制.方法 将144只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分成假伤+盐水组(n=24),假伤+丁酸钠组(n=24),烫伤+盐水组(n=48),烫伤+丁酸钠组(n=48).制作50％总体表面积Ⅲ度烫伤模型:烫伤+盐水组和烫伤+丁酸钠组大鼠麻醉、备皮后置于80℃水浴锅中(背部15 s,腹部8 s,双下肢15 s),假伤+盐水组和假伤+丁酸钠组大鼠浸入37℃水相同时间.假伤+丁酸钠组和烫伤+丁酸钠组立即皮下注射丁酸钠(300 mg/kg);假伤+盐水组和烫伤+盐水组立即皮下注射0.5 mL 0.9％氯化钠溶液.于伤后3、6h分别处死动物并取材,测定肺泡灌洗液蛋白(BALF)浓度,肺湿干重比;采用蛋白质印迹法和酶联免疫法检测肺组织多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达和含量率的变化.数据比较采用单因素方差分析和Newman-Kueuls法.结果 (1)伤后3、6h,烫伤+盐水组BALF蛋白浓度分别为(0.657 5±0.045 5)、(0.684 1±0.076 0)mg/mL,高于假伤+盐水组[(0.476 6±0.065 8)mg/mL],差异均有统计学意义(q=7.188、8.243,P值均小于0.05);伤后3、6h,烫伤+盐水组肺湿干重比分别为4.545 1±0.444 4,4.795 1±0.606 6,均高于假伤+盐水组(2.636 0±0.157 5),差异均有统计学意义(q=10.950、12.380,P值均小于0.05).伤后3、6h,烫伤+丁酸钠组BALF蛋白浓度分别为(0.541 0±0.071)、(0.538 1±0.063 6) mg/mL,均低于烫伤+盐水组[(0.657 5±0.0455)、(0.684 1±0.076 0)mg/mL],差异均有统计学意义(g=4.610、5.799,P值均小于0.05);且伤后3、6h,烫伤+丁酸钠组肺湿干重比值3.626 6±0.446 1、3.477 9 ±0.510 7,均低于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义(q=5.269、7.555,P值均小于0.05).(2)蛋白质印迹法检测结果显示,伤后3、6h,烫伤+盐水组肺组织SDC-1表达水平分别为0.376 1 ±0.0757、0.329 8±0.074 9,假伤+盐水组肺组织SDC-1表达水平均为1.000 0 ±0,2组比较差异均有统计学意义(q=13.280、14.260,P值均小于0.05).伤后3、6h,烫伤+丁酸钠组肺组织SDC-1表达水平分别为0.760 5±0.207 1、0.678 3 ±0.117 9,均高于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义(q=8.180、7.417,P值均小于0.05).伤后3、6h,烫伤+盐水组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9:2.683 4±0.318 8、2.6556±0.448 9;VEGF:3.8063±0.703 8、2.8500±0.3963),假伤+盐水组MMP-9、VEGF表达水平均为1.000 0 ±0,烫伤+盐水组均低于假伤+盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9:q=9.356、9.202),(VEGF:q=12.700、8.375);P值均小于0.05].伤后3、6h,烫伤+丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9:0.995 2 ±0.378 5、1.527 1 ±0.342 8;VEGF:1.574 6 ±0.216 0、1.721 5±0.341 8),均低于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9:g=9.383、10.100),(VEGF:q=6.272、5.108);P值均小于0.05].(3)酶联免疫法检测结果显示,伤后3、6h,烫伤+盐水组与假伤+盐水组比较,肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均显著增高,差异均有统计学意义[(MMP-9:q=8.850、8.436),(VEGF:q =9.090、9.186);P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量显著降低,差异均有统计学意义(q=8.296、8.331,P值均小于0.05).伤后3、6h,烫伤+丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均低于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9:q =6.579、6.939),(VEGF:q=7.853、7.768);P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量高于烫伤+盐水组(q=6.265、4.456,P值均小于0.05).结论 丁酸钠能减轻严重烫伤大鼠肺组织水肿,保护肺血管内皮糖萼层,其作用机制可能与抑制MMP-9和VEGF通路相关.