槐耳通过诱导自噬抑制肝癌细胞增殖与迁移

目的 探讨槐耳对人肝细胞癌(肝癌)细胞增殖与迁移的影响,并探讨其相关分子机制.方法 将肝癌细胞株SK-HEP-1和HEP3B分别设为对照组、槐耳处理组和自噬抑制剂组.CCK-8方法检测细胞活性,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移,GFP-LC3荧光融合蛋白检测自噬小体的形成,Western blot检测上皮-间充质转化(EMT)、自噬和Akt/mTOR通路相关蛋白.两组数据比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果 肝癌细胞SK-HEP-1与HEP3B活性随着槐耳浓度升高与时间的增加而降低.6 g/L槐耳处理组肝癌细胞SK-HEP-1和HEP3B的克隆数分别为(77±9)、(84±9)个,明显少于对照组的(231±15)、(257±35)个(t=-8.90,-6.33;P<0.05).槐耳可明显促进细胞凋亡,具有浓度依赖性(F=120.88,199.59;P<0.05).8 g/L槐耳处理组肝癌细胞SK-HEP-1和HEP3B的穿膜细胞数分别为(68±13)、(54±13)个,明显少于对照组的(389±28)、(411±15)个(t=-17.98,-31.47;P<0.05).Western blot检测显示,槐耳处理组N-cadhenin和Vimentin蛋白表达减弱;LC3Ⅱ表达增强,LC3Ⅰ表达减弱;p-Akt、p-mTOR、p62蛋白表达减弱,同时诱导LC3Ⅱ表达增强.自噬抑制剂3-MA可减少槐耳处理组的自噬.结论 槐耳通过促进肝癌细胞凋亡及抑制细胞增殖和转移而发挥抗肿瘤效应,其机制可能与抑制Akt/mTOR通路诱导自噬和阻止EMT有关.