p65小分子干扰RNA对THP-1细胞种植瘤生长及凋亡的影响

目的 探讨p65小分子干扰RNA (siRNA)对BALB/c-nude裸鼠体内THP-1细胞种植瘤生长及凋亡的影响及其机制.方法 将处于指数期生长的THP-1细胞(1×107个细胞/只)接种到BALB/c-nude裸鼠右腋皮下,建立THP-1细胞皮下种植瘤模型.随机分为3组:对照组、p65siRNA治疗组(每只每次2μg)、核因子-κB信号通路抑制剂Pathenolide(PN,每次10 μg/kg)治疗组,隔日1次,共2周.隔日测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测瘤组织中p65、核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)的mRNA表达,免疫组织化学检测瘤组织中p65、IκBα的蛋白表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测瘤组织细胞凋亡.结果 (1)全部裸鼠于接种后7～10d成瘤,对照组肿瘤体积持续增大;p65 siRNA组、PN组中肿瘤于治疗的前5d内生长速度和对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),第6天后肿瘤生长速度明显减慢,以p65 siRNA组作用最为明显;(2)对照组、p65 siRNA组、PN组瘤重量分别为(1.34 ±0.30)、(0.61±0.24)、(0.89±0.35)g,p65 siRNA组、PN组抑瘤率分别为54.56％、38.03％;(3)RT-PCR和免疫组织化学结果显示:p65 siRNA组、PN组中p65 mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.05),IκBα mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.05),以p65 siRNA组作用最为显著(P＜0.05).(4) TUNEL检测结果提示:p65 siRNA组及PN组中瘤组织凋亡细胞的阳性率[(17.95±3.97)％、(10.29±2.74)％]显著增高(P＜0.05),以p65 siRNA组作用最为明显(P＜0.05).结论 成功建立THP-1细胞种植瘤模型;p65siRNA可有效抑制THP-1细胞种植瘤的生长,并促进肿瘤细胞凋亡.