微小RNA Let-7b靶向CD147对大鼠垂体腺瘤GH3细胞侵袭性的影响

目的 探寻微小RNA Let-7b(Let-7b)在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中的靶基因,并观察其对GH3细胞侵袭性生长的影响.方法 利用TargetScan、PicTar、MiRanda 3种不同的生物信息学方法对靶基因进行筛选;设计Let-7b模拟物(Let-7b mimic)及反义寡核苷酸链序列(AMO),采用慢病毒转染,分别外源性导入Let-7b mimic以增加Let-7b的表达量、AMO互补结合以阻碍Let-7b功能实现,转染不含有大鼠同源序列的空白病毒为对照组.实时荧光定量核酸扩增检测系统(FQ-PCR)检测各转染组Let-7b表达量的改变;Westen blot检测转染后各组GH3细胞中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(CD147)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达量的改变;Transwell细胞小室侵袭实验研究各组细胞侵袭能力的改变.结果 大鼠GH3细胞中,Let-7b与CD147存在直接的靶向关系,并对CD147、MMP-9蛋白表达及细胞的侵袭能力有明确的抑制作用.转染mimic组的GH3细胞Let-7b的表达量是空白对照组的(9.56±0.51)倍,CD147、MMP-9蛋白表达降低,细胞的侵袭性生长受到抑制,差异有统计学意义(P＜0.05);转染AMO组的GH3细胞Let-7b的表达为对照组的(0.31±0.01)倍,CD147、MMP-9蛋白表达量增高,细胞的侵袭能力增强,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组与自然生长组Let-7b的表达量、CD147、MMP-9蛋白表达量及细胞侵袭能力差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 Let-7b靶向CD147对GH3细胞的侵袭性有抑制作用.