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CRMP2真核表达质粒在大鼠缺血/再灌注脑皮质转染效率的对比研究

Xiang-feng XING, Yu WANG, Rong-rong ZHANG,Xin-yue QIN,Tian-zhu WANG

Neural Injury and Functional Reconstruction(2020)

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摘要
目的:筛选Collapsin反应调节蛋白2(CRMP2)真核表达质粒转染大鼠脑皮质的适宜注射部位.方法:成年雄性SD大鼠150只随机分为空白质粒(VP)组、侧脑室(LV)组、海马(H)组、皮质(C)组及嗅球(OB)组.选定质粒注射部位后,20只大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(MCAO)组、缺血再灌注+空白质粒(MCAO+GFP)组、缺血再灌注+CRMP2真核质粒干预(MCAO+CRMP2/GFP)组.大鼠脑缺血/再灌注模型成功后,分别于相应4个部位立体定向注射CRMP2真核表达质粒/空白质粒,转染后24 h和48 h,采用Western blot及RT-PCR检测缺血区皮质CRMP2蛋白及mRNA的表达;激光共聚焦检测GFP的表达.TTC检测脑梗死体积,同时行神经功能评估.结果:不同部位注射CRMP2真核表达质粒后,皮质CRMP2的表达均有增高,其中LV组及H组的转染效率明显高于C组及OB组(P<0.05),LV组与H组之间差异无统计学意义(P>0.05).与MCAO及(MCAO+GFP)组相比,CRMP2真核质粒干预之后能缩小脑梗死体积,促进神经功能恢复(P<0.05).结论:CRMP2真核表达质粒能够成功转染大鼠脑组织,使缺血区皮质CRMP2蛋白及mRNA的表达明显增高.侧脑室的转染效率较其他三个部位更高.
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