p.G38R和p.D40G突变通过改变ANXA11蛋白亚细胞定位引发肌萎缩侧索硬化症

目的 本研究旨在研究Annexin A11蛋白(ANXA 11)N端突变p.G38R和p.D40G对该蛋白亚细胞定位的影响,探索其引起肌萎缩侧索硬化症(ALS)的机制.方法 构建表达ANXA11野生型蛋白(wt)及p.G38R和p.D40G突变蛋白的真核表达载体,采用激光共聚焦显微镜检测3种蛋白在HEK293细胞中的亚定位.结果 ANXA11wt、p.G38R及p.D40G蛋白均可在HEK 293细胞中形成囊泡状结构,其中p.G38R组囊泡面积大于wt组(P =0.002)和p.D40G组(P=0.006),后两组间无明显差异(P =0.791).在单个细胞中,ANXA 11 wt形成的囊泡数目大于p.G38R组(P =0.002)和p.D40G组(P＜0.001),而P.G38R组和p.D40G组差异不明显(P=0.516).与ANXA 11 wt相比,p.G38R蛋白(P＜0.001)和p.D40G蛋白(P＜0.001)在细胞核内的分布显著减少,后两者间无明显差异(P=0.519).结论 p.G38R和p.D40G突变减少了ANXA 11蛋白相关囊泡状结构的数目和ANXA11蛋白在细胞核的分布,这可能是引起ALS发病的机制之一.