地龙抗凝血活性体外评价方法的建立

目的 建立一种基于全自动血凝分析仪测定纤维蛋白原-凝血酶时间的地龙及其相关制剂的抗凝血活性的体外评价方法.方法 以威廉环毛蚓提取物为研究对象,采用BCA蛋白测定法测定可溶性蛋白含量,以抗凝血活性为指标,建立纤维蛋白原-凝血酶时间法测定活性,以活性浓度与可溶性蛋白浓度的比值(比活)作为活性评价指标.结果 10批地龙提取物可溶性蛋白含量为(26.56±3.57)％,比活为(34.64±3.98)U·μg-1.其比活大小与蚓激酶标准品(43.60 U·μg-1)相当,且是市售蚯蚓酶(22.17 U·μg-1)比活的1.5倍.结论 采用BCA蛋白测定法测定地龙提取物可溶性蛋白,方法简便、可靠;所建立的纤维蛋白原-凝血酶时间法,操作简便,人为影响因素小,结果客观准确,可用于实时测定,重复性和仪器精密度良好,线性范围较广,具有可行性,可用于地龙及其制剂活性的评价.