长效FGF23抑制剂的设计及其在毕赤酵母中的制备

低磷血症是人类磷代谢失常的常见疾病,成纤维细胞生长因子23 (fibroblast growth factor-23,FGF23)可以作用于肾曲小管减少肾脏对无机磷重吸收.保留C端73个氨基酸的FGF23C-tai1作为FGF23的抑制剂,可以增加肾脏对无机磷重吸收,因此FGF23C-tail在低磷血症的药物开发中显得尤为重要.本文首次将FGF23C-tail与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)融合,并尝试在毕赤酵母表达系统制备表达.融合PCR构建重组基因,经克隆株的抗性筛选和表达量筛选,获得一株毕赤酵母高产量的表达菌株,摇瓶的表达量为43.7 mg·L-1.5L发酵罐的研究表明,表达量可高达265.6 mg· L-1.经三步纯化步骤后,获得纯度大于95％的FGF23C-tail-HSA融合蛋白.经宜春学院伦理委员会批准,蛋白的体内大鼠实验显示,FGF23C-tail-HSA具有FGF23抑制剂的功能,且能显著地提高大鼠的血磷水平.本研究为FGF23C-tail-HSA生理学活性的深入研究和FGF23C-tail的药物开发提供基础.