慢病毒介导TGF-β3转染兔脂肪间充质干细胞对其向成软骨细胞分化的影响

目的 探讨转化生长因子-β3((TGF-β)3)基因对脂肪间充质干细胞体向成软骨分化能力的影响.方法 用含TGF-β3目的基因的慢病毒载体转染脂肪间充质干细胞,通过流式细胞术及共聚焦检测转染效率 、细胞活性检测法(CCK-8)、荧光定量-PCR(RT-PCR)等实验方法进行成软骨分化相关内容的检测.结果 转染96 h时感染复数M OI=50及M OI=100二者检测EGFP绿色荧光蛋白的表达无明显差异,TGF-β3慢病毒转染的脂肪间充质干细胞的长梭形细胞形态优于慢病毒空载体转染后脂肪间充质干细胞的形态.与空白组比较慢病毒转染后的细胞数量无明显减少.转染含有TGF-β3慢病毒的脂肪间充质干细胞从基因水平可合成更多的成软骨分化相关的聚蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ 型胶原(COL2A1)、性别决定区Y框蛋白(SOX-9)明显高于空白组(P<0.05),形成更多的细胞外基质.结论 TGF-β3目的基因由慢病毒载体导入细胞内,是诱导ADSCs成软骨分化的理想的途径,可作为软骨组织工程的种子细胞来源.