牙髓干细胞对兔面神经损伤的修复作用及其机制

目的:通过手术建立兔面神经损伤模型,探讨牙髓干细胞对兔面神经损伤的修复作用,阐明其可能机制.方法;分离、培养并诱导牙髓干细胞.45只兔随机分为正常对照组、模型组和实验组,每组15只.除正常对照组外,其余各组兔沿嘴角至耳前处做长约3 cm的切口,离断面神经上颊支,建立面神经上颊支损伤的动物模型.1周后向实验组兔手术术腔部位注入0.1 mL牙髓干细胞悬液(5×106个),正常对照组兔不作任何处理,模型组兔注射等量磷酸盐PBS缓冲液.术后2周观察各组兔行为表现及面部胡须运动功能评分,HE染色观察各组兔面神经组织病理形态表现,免疫组织化学染色观察兔面神经组织中脑源神经生长因子(BDNF)和睫状神经生长因子(CNTF)阳性细胞数,透射电镜观察兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度.结果:成功分离鉴定原代幼兔牙髓干细胞,大多数呈成纤维状、长梭形.HE染色后,第3代干细胞的细胞核呈深蓝色、卵圆形,呈梭形着色深细胞为成纤维细胞样细胞.与正常对照组比较,模型组兔面部胡须运动功能评分降低(P＜0.05);与模型组比较,实验组兔面部胡须运动功能评分升高(P＜0.05).与模型组比较,实验组兔治疗10周后,再生神经纤维较多,呈束状且紧密.与正常对照组比较,模型组兔面神经组织中BDNF和CNTF阳性细胞数明显降低(P＜0.05);与模型组比较,实验组兔面神经组织中BDNF和CNTF阳性细胞数明显升高(P＜0.05).与正常对照组比较,模型组兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度明显降低(P＜0.05);与模型组比较,实验组兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度数均明显升高(P＜0.05).结论:牙髓干细胞对面神经损伤具有一定的修复作用,其机制可能与上调BDNF及CNTF表达有关联.