丝氨酰tRNA合成酶(SerRS)结合并激活去乙酰化酶SIRT2的机制

目的 探究丝氨酰tRNA合成酶(seryl-tRNA synthetase,SerRS)结合并激活去乙酰化酶SIRT2的机制.方法 构建SerRS与SIRT2质粒,在293T细胞中进行转染.免疫共沉淀方法检测SerRS与SIRT2、SIRT2突变型之间的相互作用.通过原核纯化蛋白质,体外荧光方法检测SerRS对SIRT2酶活影响.通过结构模拟探究SIRT2的H187位点调控机制.通过Western blot方法检测SerRS的乙酰化修饰.结果 SerRS能与SIRT2相互作用,并增强其去乙酰化酶活性.SIRT2 H187Y突变使SIRT2失活,同时也阻断了SIRT2与其SerRS的结合.进一步通过结构模拟发现,SIRT2上的H187Y突变与Q267位点在空间上发生冲突,可能改变SIRT2的构象,进而影响与SerRS的结合界面,且SIRT2能够去乙酰化SerRS.结论 SIRT2第187位组氨酸能够调控SerRS与SIRT2的结合,为靶向SIRT2的药物研发提供了新的思路.