熊果酸通过抑制自噬对血清剥夺诱导的H9c2细胞起抗凋亡作用

目的 冠状动脉粥样硬化心脏病(coronary atherosclerotic cardiopathy)造成的心肌缺血(myocardial ischemia)严重威胁人类生命安全,本研究从细胞水平阐述了熊果酸(ursolic acid,UA)对血清剥夺心肌细胞自噬和凋亡的作用.方法 体外培养大鼠H9c2心肌细胞.分为对照组、血清剥夺组、熊果酸处理组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理联合熊果酸组、雷帕霉素预处理联合熊果酸组.流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3、Beclin1、ATG5以及凋亡相关蛋白cleaved-caspase3、BcL-2、Bax的表达.结果 10μmol/L熊果酸为处理H9c2细胞的最适浓度;血清剥夺能造成H9c2细胞LC3 II/I比值、Beclin1和ATG5表达增加(P<0.01),熊果酸处理后能降低其表达(P<0.05);血清剥夺造成H9c2细胞凋亡率增加(P<0.001),熊果酸处理后能降低凋亡率(P<0.01),3-MA预处理组能进一步降低凋亡率(P<0.001),而雷帕霉素预处理组凋亡率上升(P<0.001);血清剥夺能造成H9c2细胞cleaved-caspase3表达量、Bax/BcL-2比值升高(P<0.001),熊果酸处理后抑制了血清剥夺造成的cleaved-caspase3的表达量和Bax/BcL-2比值升高(P<0.01),3-MA预处理组能进一步降低cleaved-caspase3的表达量和Bax/BcL-2比值(P<0.001),雷帕霉素预处理组Bax/BcL-2比值回升(P<0.05).结论 熊果酸对血清剥夺H9c2细胞的抗凋亡作用与抑制自噬有关.