ABTS底物检测漆酶活力条件和算法比较——以长白山两种林分土壤为例

选取长白山针叶林与阔叶林A层土壤,以0.25～12.5 mmol L-1不同终浓度2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)为底物,考察漆酶氧化产物在0～32、0～ 54和0～ 95 min吸光值线性变化率,并藉此获得3个不同时间段线性拟合漆酶活力值;以一级反应动力学方程拟合最大吸光值增幅及相应平均反应时间,计算吸光值平均变化率,并藉此获得非线性拟合漆酶活力值.当ABTS浓度为7.5 mmol L-1时,反应体系吸光值增幅和酶活最大.阔叶林反应体系吸光值增量显著大于针叶林,前者在0～300 min持续增加,且不同算法间漆酶活力差异不显著;后者仅在0～21 min显著变化,且非线性拟合漆酶活力值显著高于线性拟合.非线性拟合测算的漆酶活力变异系数整体上低于线性拟合.因此,森林土壤漆酶活力测定应重视酶底物浓度、反应时间、算法和林分条件变化带来的显著影响.