HbTCTP及其截短体酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
Molecular Plant Breeding（2020）
摘要
为进一步鉴定橡胶树翻译控制肿瘤蛋白(HbTCTP)与橡胶延伸因子1(HbREF1)互作的分子区域,构建HbTCTP及其截短体的诱饵载体.本研究利用RT-PCR技术从橡胶树胶乳中扩增出包含HbTCTP不同结构域的片段,克隆到pGBKT7表达载体,通过酶切、菌落PCR和测序鉴定后,转化酵母Y2HGo1d感受态细胞,检测诱饵蛋白是否具有自激活作用和毒性.结果 显示,成功构建6个包含HbTCTP不同结构域的诱饵载体,且诱饵载体对酵母宿主细胞无毒性和无自主激活报告基因的功能.本研究结果为进一步筛选HbTCTP与HbREF1互作的分子区域及阐明HbTCTP的功能提供科学依据.
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