莲瓣兰转录因子 MADS 家族 DEF 基因克隆及拟南芥遗传转化

本研究以莲瓣兰‘玉兔彩蝶’花瓣为材料，根据 GenBank 中已经登录的春兰 DEF 基因序列(HM106982.1)设计引物，克隆 DEF 基因开放阅读框，构建表达载体，转化‘拟南芥’，并验证基因功能。研究结果表明：所扩增的 DEF 基因开放阅读框大小为669 bp，编码222个氨基酸，预测蛋白质分子质量为25.560 kD。该基因具有典型的植物 MADS-box 基因结构域，与春兰开放阅读框同源性达99%，与其它兰花同源性都在90%以上。将 DEF 基因构建到植物真核表达载体 pCAMBIA2300中，利用农杆菌花序法转化拟南芥，经 PCR 分子鉴定，获得含 DEF 转基因拟南芥植株。