表达PEDV中国变异株S基因重组猪伪狂犬病病毒的构建和纯化

Pan-pan YANG,Yan-yang WU,Dong-dong YANG,Dong-sheng GAO,Chuan-qing WANG,Jun ZHAO,Cun-fa LI

Chinese Journal of Veterinary Science（2018）

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Abstract
为了研制出能够同时预防猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染的二联活疫苗,本研究将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和PEDV中国变异株的纤突蛋白免疫决定簇区域(S1)基因分别克隆至含有PRV胸苷激酶(TK)基因上、下游同源臂的穿梭载体pTK中,构建重组PRV转移质粒pTK-EGFP和pTK-S1.将重组质粒pTK-EGFP与PRV疫苗毒株Bartha-K61基因组DNA共转染Vero细胞,经绿色荧光蚀斑纯化得到重组病毒rPRV-EGFP.随后将重组质粒pTK-S1与rPRV-EGFP基因组DNA共转染Vero细胞,通过反向筛选EGFP阴性蚀斑,蚀斑纯化得到表达PEDV S蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-S1.本研究将为更有效防控猪伪狂犬病和猪流行性腹泻提供辅助工具.
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