水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立

霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是引起全球范围的食源性疾病的重要病原菌，建立一种能准确鉴别这3种弧菌的方法具有重要意义。groEL基因是包括弧菌属在内的多种细菌检测的分子标记。本研究根据3种弧菌的groEL基因分别设计引物，经PCR扩增及反应条件的优化，建立一种能同时检测这3种弧菌的多重PCR方法。结果表明应用多重PCR技术对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌能分别特异性地扩增出418、644、192 bp的目的片段。检测其他非目标供试菌时，不出现任何扩增条带。敏感性检测结果表明，对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌最低检测限分别为102、102、103CFU/mL。人工染菌水产品检测结果显示，所建立的多重PCR方法能够有效检测出目的细菌，而未染菌组均为阴性。本文通过建立的多重PCR方法实现了对这3种弧菌的同时检测，具有快速、灵敏度高和特异性强等优点，对水产品中这3种弧菌的检测和流行病学调查具有重要意义。