不同浓度氯化钴对原代脑微血管内皮细胞增殖与缺氧诱导因子HIF-1α表达的研究

目的 研究不同浓度的氯化钴(CoCl2)对原代脑微血管内皮细胞(BMECs)细胞增殖和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 利用不同浓度的(0、50、100、200、400、800μmol/L)CoCl2建立原代脑微血管内皮细胞缺氧模型.通过MTT法检测CoCl2对原代脑微血管内皮细胞的体外生长增殖活性的影响.定量PCR(RT-PCR)、 蛋白免疫印迹法检测BMECs中HIF-1α的mRNA及蛋白表达情况.结果 MTT显示CoCl2对BMECs细胞增殖抑制作用表现出浓度依赖性抑制作用.免疫印迹法显示HIF-1α的蛋白表达水平在(50、100、400、800)μmol/L,HIF-1α在细胞中的表达与CoCl2浓度0μmol/L没有差异改变(P>0.05),浓度为200μmol/L时,HIF-1α蛋白表达与对照组CoCl2浓度为0μmol/L相比有显著差异(P<0.01).RT-PCR显示BMECs细胞HIF-1α的mRNA表达随CoCl2浓度升高无明显变化(P>0.05).结论 CoCl2可抑制细胞的增殖,同时CoCl2化学缺氧模型可较好的模拟缺氧引起的BMECs细胞HIF-1α上调;通过上调HIF-1α可增加对脑微血管内皮细胞的损害,为下一步耐缺氧脑损伤药物实验奠定基础.