斑马鱼眼部细胞凋亡模型的建立
Chinese Pharmacological Bulletin（2019）
Abstract
目的建立邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导的斑马鱼眼部细胞凋亡模型,并用于抗眼部细胞凋亡药物的活性评价。方法斑马鱼受精后30 h（hpf）,加入DBP(0.1、10、50、100μmol·L-1)18 h和42 h,观察斑马鱼的存活率;将30或54 hpf的斑马鱼在直射光或非直射光条件下,加入DBP(0.1、1、5、10、50μmol·L-1)造模18 h,吖啶橙染色（AO）,采用体视荧光显微镜观察斑马鱼眼部细胞凋亡情况;造模同时,给予不同浓度N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）或人参皂苷Rg1,观察药物对斑马鱼眼部细胞凋亡的影响。结果 DBP造模18、42 h, 10μmol·L-1及以下浓度对鱼卵存活率无明显影响,50μmol·L-1及以上浓度会致使斑马鱼存活率明显降低（P<0.01）;30 hpf的斑马鱼在10μmol·L-1 DBP造模18 h后显示明显的眼部细胞凋亡（P<0.01）。斑马鱼在72 h可见眼部细胞自发性凋亡,且与光照条件无关。在该造模条件下,NAC或人参皂苷Rg1均能抑制斑马鱼眼部细胞凋亡（P<0.05）。结论利用DBP可快速高效地建立斑马鱼眼部细胞凋亡模型,该模型可用于药物活性的快速评价。
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