目的观察敲低periostin对PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达的影响。方法体外培养小鼠系膜细胞,细胞以10μg·L-1 PDGF刺激,分别于刺激0、2、4、6、12 h时收集"/>
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敲低periostin对PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达的影响

Chinese Pharmacological Bulletin(2019)

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摘要
目的观察敲低periostin对PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达的影响。方法体外培养小鼠系膜细胞,细胞以10μg·L-1 PDGF刺激,分别于刺激0、2、4、6、12 h时收集细胞,Western blot检测periostin、PCNA、FN、TGF-β1蛋白的表达水平;细胞免疫荧光检测periostin蛋白表达和定位。另外,细胞随机分为control组、PDGF组、PDGF+空质粒转染(PDGF+sh-nc)组和PDGF+periostin沉默质粒(PDGF+sh-periostin)组,后3组以10μg·L-1 PDGF孵育6 h后终止培养,Western blot检测periostin、PCNA、FN、TGF-β1表达水平。结果 PDGF上调periostin蛋白表达,6 h达到高峰,12 h明显回落;细胞免疫荧光检测结果显示,PDGF刺激下periostin在胞质表达明显增强。PDGF可导致PCNA、FN、TGF-β1表达增强。periostin沉默质粒能够抑制PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达,下调PCNA、FN、TGF-β1蛋白表达。结论 PDGF诱导periostin在体外培养的小鼠系膜细胞表达增加,并上调系膜细胞增殖水平和细胞外基质表达水平。periostin沉默质粒部分逆转PDGF引起的系膜细胞增殖和FN、TGF-β1蛋白表达。
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关键词
periostin,PDGF,PCNA,TGF-β1,FN,小鼠系膜细胞,
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