M3胆碱能受体在大鼠脊髓Ⅱ板层甘氨酸能神经元递质释放中的作用

目的 探讨M3胆碱能受体在大鼠脊髓Ⅱ板层甘氨酸能神经元递质释放中的作用.方法 健康雄性清洁级SD大鼠,周龄3～4周,体重160～180g,取鞘内置管成功的大鼠20只,随机分为2组(n=10):生理盐水组(NS组)鞘内注射生理盐水10μl;PTX组鞘内注射百日咳毒素1.5μg/10μl.于鞘内注射后第7天,制备脊髓薄片,采用全细胞膜片钳技术,于细胞封接后稳定5 min,灌流液中加入终浓度为3 μmol/L的M胆碱能受体激动剂Oxo-M,3 min后洗脱,稳定5 min后加入终浓度为25 nmol/L的特异性M3胆碱能受体阻断剂4-DAMP,3 min后加入于终浓度为3 μmol/L的Oxo-M.于加入Oxo-M前(T1)、加入Oxo-M后3 min(T2)、加入4-DAMP后3 min(T3)、再次加入Oxo-M后3 min(T4)时记录甘氨酸能神经元自发抑制性突触后电流(sIPSCs)的频率和波幅.结果 与T1时比较,两组T2时甘氨酸能神经元sIPSCs频率升高(P＜0.01),其余时点差异无统计学意义,T2～4时甘氨酸能神经元sIPSCs波幅差异无统计学意义(P＞0.05);与T2时比较,两组T4时甘氨酸能神经元sIPSCs频率降低(P＜0.05或0.01);两组甘氨酸能神经元sIPSCs频率和波幅比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 M3胆碱能受体在大鼠脊髓Ⅱ板层甘氨酸能神经元递质释放中发挥主要作用.