β-catenin在硬皮病皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化的影响

目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)在系统性硬皮病(SSc)患者皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 采用免疫组织化学SP法检测45例SSc患者皮损组织及20例健康成人皮肤组织中-catenin、Snail1、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况.采用不同质量浓度Wnt10b[0(空白对照)、2、4 ng/mL]处理人表皮角质形成细胞HaCaT 48 h,免疫荧光实验检测β-catenin在HaCaT细胞中的定位;实时荧光定量PCR检测HaCaT细胞中Snail1、Snail2 mRNA水平;Western blot法检测HaCaT细胞中β-catenin、波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、E-cadherin蛋白表达.结果 β-catenin、Snail1、E-cadherin阳性率在SSc患者皮损组织中依次为100％、88.89％和2.22％,在健康成人皮肤组织中依次为0％、10.00％和95.00％,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).与空白对照组比较,不同质量浓度Wnt10b(2、4 ng/mL)处理可诱导HaCaT细胞中β-catenin表达上调并促进β-catenin由细胞质向细胞核中转位,同时还可以提高HaCaT细胞中Snail1和Snail2 mRNA表达(P＜0.05),并上调Vimentin、N-cadherin蛋白表达和下调E-cadherin蛋白表达(P＜0.05).结论 SSc皮损中存在异常活化的Wnt/β-catenin信号通路及异常表达的EMT相关蛋白,且激活Wnt/β-catenin信号通路可促进HaCaT细胞EMT的发生.