猪繁殖与呼吸综合征病毒样颗粒的构建
Chinese Veterinary Science（2015）
摘要
为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)病毒样颗粒(VLPs)疫苗,以分离鉴定的HP-PRRSV CQ株的GP5和M蛋白的全部编码基因为模板,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统,共表达GP5蛋白和M蛋白,并采用SDS-PAGE、Western-blot对重组蛋白进行定性分析;通过透射电子显微镜对病毒样颗粒进行直观的形态学鉴定.结果表明,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统能够成功地共表达重组质粒pFastBac1-GP5-M的GP5蛋白和M蛋白,并能自动装配成病毒样颗粒,显示具有与天然蛋白类似的免疫原性;电镜观察到病毒样颗粒的形态与文献中描述一致,直径约为50 nm.本试验结果为猪繁殖与呼吸综合征病毒样颗粒疫苗的研究奠定了基础.
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关键词
porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV),GP5 protein,M protein,virus-like particles(VLPs)
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