人食管癌Eca-109细胞Mr小于3000膜蛋白肿瘤抗原肽的筛选

目的:寻找被T细胞识别的食管癌细胞抗原肽,为食管癌免疫治疗奠定基础.方法:应用pH 3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液间隔24 h多次酸洗贴壁生长的Eca-109细胞,获得人主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(HLA-Ⅰ)类分子结合的多肽,经超过滤,反相HPLC色谱层析得到不同组分多肽,DC递呈抗原肽刺激特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应,51Cr杀伤实验检测CTL对肿瘤细胞杀伤作用.结果:Mr小于3 000的混合多肽经过反相HPLC可获得50多个组分,混合肽、P17、P29和P41组分体外诱导实验表明可以诱导出较强的CTL反应.结论:酸洗法能有效获得HLA-Ⅰ类分子结合的多肽抗原,Mr小于3 000的多肽成分中3个组分存在能引起特异性的抗肿瘤CTL免疫反应的肿瘤抗原,具有潜在的免疫治疗作用.