Prohibitin基因转染对肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的 探讨转染外源性Prohibitin(PHB)基因对体外培养的肾小管上皮细胞株(NRK-52E)表型转化的影响.方法 将构建的pcDNA3.1(+)-PHB1 、pcDNA3.1(+)-PHB2质粒转染体外培养的NRK-52E细胞作为转染组,以空载体转染NRK-52E细胞为阴性对照组,以正常NRK-52E细胞为空白对照组,分别应用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染24h、48 h、72 h各组NRK52E细胞PHB1 、PHB2及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表达.结果 1.转染24 h、48 h、72 h时转染组NRK-52E细胞的PHB1 、PHB2 mRNA及其蛋白表达均较阴性对照组和空白对照组增高(Pa＜0.05),且48 h表达量最高,而阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义.2.转染24 h 、48 h、72 h时转染组NRK-52E细胞α-SMA mRNA和蛋白表达均较阴性对照组和空白对照组降低(Pa＜0.05),48 h表达量最低,阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义.3.转染组48h NRK-52E细胞PHB1 、PHB2蛋白表达量与α-SMA蛋白表达量均呈负相关(r=-0.942、-0.869,Pa＜0.05).结论 转染外源性PHB基因可以抑制体外培养的NRK-52E细胞的表型转化.