m iR-195表达在乳腺癌细胞对阿霉素药物敏感性中的意义

目的：调控miR-195在乳腺癌细胞中的表达对阿霉素药物（ADR ）敏感性的影响及其作用机制进行研究。方法利用脂质体将成熟miR-195模拟物（miR-195 mimic）及阴性对照转染至乳腺癌细胞MCF-7，采用实时定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测细胞中miR-195的表达变化；采用M T T比色法及流式细胞术（FCM ）检测转染miR-195模拟物及其对照经ADR作用后细胞的增殖及凋亡；Western-blot检测细胞中Raf-1、P-gp、Bcl-2蛋白的表达。结果转染miR-195 mimic后，明显上调了细胞中miR-195的表达水平（P＜0．01）；在miR-195 mimic与ADR联合作用后，明显抑制了细胞的增殖，其敏感性与对照组相比，提高近2．5倍（P＜0．05），同时促进了细胞的凋亡（P＜0．05）；Western-blot检测发现在转染miR-195 mimic后，细胞中Raf-1蛋白及BCL-2、P-gp蛋白的表达显著降低（P＜0．01）。结论在乳腺癌细胞中，miR-195作为抑癌基因，能够有效促进乳腺癌细胞对ADR所介导的化疗敏感性，其作用机制至少部分是通过miR-195负性调控Raf-1蛋白的表达来实现。