系列鼠抗CD分子单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆和序列分析

张爱华,闭兰,王志友,张囡,左建民,赵良,沈韬, 周玉柏,孙可芳,金玉玲,陈敬,史良如

Zhongguo shengwuzhipinxue zazhi（2002）

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摘要

目的获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序.方法采用RT-PCR技术,从WuT3、WuT4、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变区基因,进行克隆并作核苷酸序列分析.结果以上几种抗体的轻重链可变区的PCR产物大小均为400bp左右,成功构建了pMD18-T-VL和pMD18-T-VH克隆载体,经限制性酶切分析,其大小与预期结果相符,并按ABI PRISM BigDye系统测序.结论经与Kabat、Blast抗体基因同源数据库比较,所获基因片段均为抗体基因.

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