微小RNA-21对过敏性紫癜患儿B细胞白细胞介素10表达的影响

目的 探讨微小RNA(miRNA)-21对过敏性紫癜患儿外周血B细胞白细胞介素(IL)10表达的影响.方法 前瞻性队列研究.选取2016年3月至2017年1月深圳市儿童医院风湿免疫科住院过敏性紫癜患儿24例(男女各12例)为研究对象,分为紫癜肾炎组(14例)和非肾炎组(10例);选取同年龄健康儿童34名为对照组.流式细胞术检测过敏性紫癜患儿及对照组儿童外周血B细胞(CD19+),过渡性B细胞(CD19+CD24hiCD38hi)和初始B细胞(CD19+CD24intCD38int)胞内IL-10表达水平.实时PCR检测B细胞与IL-10表达相关的miRNA:miR-21-5p、miR-106a-5p、miR-98-3p、miR-142-3p、miR-142-5p、miR-98-5p、miR-155-5p、miR-let7b-5p.转染阴性对照(agomir NC-FAM)和agomir-21-5p-FAM至过敏性紫癜患儿外周血B细胞,激光共聚焦显微镜及流式观察miRNA在B细胞的摄取,并比较转染后B细胞IL-10的表达.组间比较采用t检验或单因素方差分析,相关性分析采用Spearman检验.结果 (1)CD19+B细胞及其两种不同分化阶段的B细胞群体均可表达IL-10,过敏性紫癜患儿三种B细胞群体(CD19+、CD19+CD24hiCD38hi、CD19+CD24intCD38int)IL-10表达均明显低于健康对照组(1.4±0.2比2.4±0.3, t=3.501, P<0.01;1.2±0.2比2.2±0.3, t=2.688, P<0.05;1.6±0.3比2.7±0.4, t=2.498, P<0.05);紫癜肾炎组与健康对照及非肾炎组比较,B细胞IL-10表达最低,两两相比差异均有统计学意义(1.1±0.2比2.4±0.3, 1.8±0.3,t=4.006, 2.362,P<0.001,P<0.05).(2)过敏性紫癜患儿B细胞miR-21-5p表达低于健康对照组,紫癜肾炎组更显著,差异有统计学意义(1.2±0.9比3.5±2.8, t=2.962, P<0.01);其余miRNA表达水平无明显改变.(3)相关性分析显示过敏性紫癜B细胞IL-10与miR-21-5p表达呈正相关(r=0.778, P<0.001).(4)与阴性对照组相比,转染agomir-21-5p可明显增强过敏性紫癜患儿B细胞IL-10表达,差异有统计学意义(2.7±0.2比1.6±0.3, t=3.091, P<0.05).结论 过敏性紫癜患儿外周血B细胞miR-21-5p表达不足,是引起B细胞IL-10表达降低的原因之一.