内吗啡肽-1对高糖诱导的人外周血树突状细胞成熟和TLR4表达的影响

目的:探讨内吗啡肽-1(EM-1)对高糖诱导的人外周血来源树突状细胞(PBDC)成熟表型、细胞因子分泌、T细胞增殖和TLR4表达的影响,探讨EM-1对DC免疫功能的调节机制.方法:本研究外周血样品取自18-20岁学生志愿者,将外周血单个核细胞(PBMNC)诱导成未成熟的树突状细胞(imDC).使用高浓度葡萄糖作为刺激因素,EM-1作为干预因素,将实验分为正常葡萄糖(NG)、高糖(HG)、加入EM-1的高葡萄糖(EM)、加入EM-1和纳洛酮的高葡萄糖(Nal)共5组.应用流式细胞术检测PBDC表型变化,ELISA检测PBDC与自体淋巴细胞共培养分泌的细胞因子的变化,CFSE法检测T淋巴细胞的增殖情况,RT-PCR法检测PBDC表面TLR4的表达.结果:与HG组比较,EM组PBDC表面分子CD86、CCR7和CD36表达上调(P＜0.01),而CD83的表达无统计学意义.EM组PB-DC分泌的IL-12,IL-10和PBDCs刺激的T淋巴细胞增殖指数均下降.与EM组比较,Nal组CD86,CCR7,CD36表达降低(P＜0.01),而CD83表达几乎没有变化(P＞0.05).Nal组T淋巴细胞增殖指数极显著升高(P＜0.01).HG组TLR4灰度比值高于NG组,EM组明显低于HG组(P＜0.01).结果表明,高葡萄糖可以促进PBDC TLR4的表达,而EM-1抑制TLR4的表达.结论:EM-1上调高糖诱导的PBDC表面分子CD86,CCR7和CD36的表达,抑制高糖诱导的PBDC成熟.分泌的炎性细胞因子IL-12和IL-10抑制来自PBDC的T淋巴细胞的增殖,而纳洛酮抑制EM-1的作用.EM-1抑制高糖诱导的PBDC表面TLR4的表达.