盐酸小檗碱改善慢性炎症痛和抑郁的作用研究

目的 探讨盐酸小檗碱(BBR)对小鼠慢性炎症痛及其伴发的抑郁样症状的影响及其机制.方法 本实验使用雄性ICR小鼠40只,2月龄,体质量25 ～ 30 g.采用小鼠足底注射完全弗氏佐剂(CFA)的方法建立慢性痛动物模型.应用随机数字表法将小鼠分为4组(n=10):生理盐水组(A组)、慢性痛组(B组)、生理盐水+ BBR组(C组)、慢性痛+BBR组(D组).所有动物在注射CFA或生理盐水之前均进行疼痛和抑郁行为学实验以测量行为学基线值.之后在实验第1天(d1),B组和D组足底注射50μl CFA(生理盐水1∶1稀释),A组和C组足底注射等量生理盐水;在d15～d21,C组和D组腹腔注射BBR 50 mg/kg,共持续7d,A组和B组注射等容量生理盐水.通过Hargreaves方法和Von Frey纤毛在建模以前、d7、d14、d17和d21分别进行热痛和机械痛阈值测定;通过强迫游泳和摄食抑制实验在建模以前和d21进行抑郁样行为指标测定.在行为学结束之后处死所有动物,取L4～L5段脊髓采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠脊髓中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,并通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析CC趋化因子配体2(CCL2)的mRNA水平.结果 与A组相比,B组小鼠在d7、d14、d17、d21的热痛阈值均显著降低[(3.40 ±0.67)s比(10.55±1.58)s、(7.49±1.04)s比(11.47±1.92)s、(6.46 ±0.56)s比(11.60±1.86)s、(6.04±0.54)s比(10.33±1.59)s,均P＜0.01],机械痛阈值均显著降低[(0.15±0.03)g比(0.78 ±0.24)g、(0.23 ±0.12)g比(0.60±0.16)g、(0.30 ±0.12)g比(0.72±0.25)g、(0.40±0.00)g比(0.72±0.19)g,均P＜0.01],在d21强迫游泳不动时间延长[(161.60 ±35.79)s比(88.92±53.24)s,P＜0.05],摄食潜伏期延长[(227.40±57.5)s比(77.25±26.45)s,P＜0.01],提示CFA可诱发痛觉过敏和抑郁样行为.连续7 d BBR处理后,与B组比较,D组小鼠的热痛阈值[(9.99±2.68)s比(6.04±0.54)s,P＜0.01]显著升高,机械痛阈值显著升高[(0.80 ±0.21)g比(0.40±0.00)g,P＜0.01],其不动时间缩短[(92.97±44.31)s比(161.60±35.79)s,P＜0.05]以及摄食潜伏期缩短[(105.00±50.00)s比(227.40±57.5)s,P＜0.01].炎症因子和趋化因子水平检测提示,与A组比较,B组小鼠脊髓中IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度均升高[(29.90±4.87) pg/ml比(21.00±5.46) pg/ml、(131.10±26.12) pg/ml比(60.68±23.47) pg/ml、(21.54±4.93) pg/ml比(11.39±3.66) pg/ml,均P＜0.01],CCL2的mRNA表达也显著上调[(2.21±0.60)比(1.00±0.37),P＜0.01].连续7 d BBR处理后,与B组比较,D组小鼠脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度显著下调[(19.44±4.83) pg/ml比(29.90±4.87) pg/ml、(57.82±32.28)pg/ml比(131.10±26.12) pg/ml、(9.29±2.46) pg/ml比(21.54±4.93) pg/ml,均P＜0.01],CCL2的mRNA水平显著降低[(1.33±0.40)比(2.21 ±0.60),P＜0.05].结论 盐酸小檗碱可以改善CFA诱导的慢性炎症痛以及与其共患的抑郁样行为,其机制可能与盐酸小檗碱抑制炎症因子释放和下调CCL2的转录水平有关.